Oleh karena itu, Eversa Transform 2.0 yang baru memungkinkan pemrosesan enzimatik bahan baku berminyak dengan kandungan FFA apa pun hanya dalam satu batch sebagai proses yang menggabungkan CalleraTM Trans L dan CalleraTM 204 Ultra. Eversa Transform 2.0 mengandung sebagai komponen enzim, ester hidrolase karboksilat yang direkayasa (EC 3.1.1.3) yang diproses dari TLL dan diproduksi oleh fermentasi terendam dari strain Aspergillus oryzae yang dimodifikasi secara genetik, di mana gen protease basa bernama "alp" telah dihapus
Eversa Transform 2.0 (NS-40116) diluncurkan di pasar dengan biaya lebih rendah dibandingkan dengan enzim yang digunakan secara tradisional (20,0 USD/kg), membuat produksi biodiesel dengan katalisis enzimatik menggunakan bahan baku berminyak murah menjanjikan.
Seperti yang telah dijelaskan sebelumnya, Eversa telah diluncurkan untuk digunakan sebagai enzim bebas; oleh karena itu, hanya beberapa makalah yang bermaksud imobilisasi, dan ini telah diinisialisasi baru-baru ini. Memang, upaya imobilisasi Eversa dimulai pada 2018. Rombongan pionir dipimpin oleh Prof. de Oliveira.
Misalnya, Eversa (disebut sebagai NS-40116 dalam makalah ini) diimobilisasi dalam busa poliuretan fleksibel. Enzim terperangkap dan kemungkinan besar tetap tidak bergerak karena imobilisasinya melalui aktivasi antarmuka pada matriks hidrofobik. Dalam penelitian ini, toluena diisosianat dan polieter digunakan untuk menghasilkan busa dan enzim amobil mempertahankan 80% aktivitas awal setelah penyimpanan pada 4 C selama satu bulan. Namun, stabilitas operasional biokatalis amobil tidak terlalu tinggi, hanya mempertahankan 50% aktivitas setelah 5 siklus hidrolisis minyak.
Satu penjelasan yang mungkin untuk stabilitas yang buruk ini mungkin adalah pelepasan enzim karena sifat seperti deterjen dari FFA, monogliserida dan digliserida yang dihasilkan. Kemudian, kelompok de Oliveira melumpuhkan Eversa dalam dukungan hidrofobik yang berbeda (sekali lagi melalui aktivasi antarmuka ), memperoleh aktivitas transesterifikasi tertinggi menggunakan Sepabeads C-18.
Biokatalis amobil digunakan dalam produksi biodiesel dalam heksana menggunakan minyak bunga matahari, Anehnya, enzim amobil lebih stabil dalam metanol daripada dalam etanol, bertentangan dengan sebagian besar profil stabilitas pelarut lipase . Kemudian, kelompok penelitian ini melumpuhkan Eversa (sekali lagi disebut sebagai NS-40116) pada matriks hidrofobik, menggunakan  teknik sol-gel.
Para penulis menggunakan tetraetil ortosilikat sebagai prekursor silika dan polietilenglikol (MW1500) sebagai aditif penstabil enzim. Mereka menyiapkan tiga biokatalis yang berbeda menggunakan katalis yang berbeda untuk polimerisasi sol-gel: NaOH, HBr atau HCl. Xerogel yang dihasilkan menggunakan NaOH sebagai katalis menghasilkan biokatalis yang menunjukkan aktivitas tertinggi (lebih dari 15 kali lipat lebih tinggi daripada enzim non-imobilisasi). Biokatalis amobil ini memperbesar kisaran suhu di mana enzim dapat digunakan . Dalam studi lain, enzim itu bergerak dalam polistiren tidak berpori (sekali lagi melalui aktivasi antarmuka.
Enzim amobil menunjukkan stabilitas termal yang lebih tinggi pada suhu yang berbeda nilai pH; Selain itu, aktivitas hidrolitik enzim dikalikan lebih dari 1,8 pada pH 12. Biokatalis diterapkan dalam hidrolisis minyak kedelai dan juga dalam esterifikasi dan transesterifikasi lemak ayam abdomen dengan alkohol rantai rendah.
 Kemudian, kelompok penelitian ini mengamobilisasi enzim dalam busa poliuretan yang telah diproduksi dengan memanfaatkan biopoliol, yang dihasilkan oleh gliserolisis minyak jarak yang dikatalisis oleh Novozym 435 (salah satu biokatalis lipase yang paling banyak digunakan).
 Biokatalis Eversa amobil lebih stabil daripada enzim bebas, terutama pada nilai pH asam. Dalam esterifikasi FFA dan metanol, biokatalis ini mempertahankan hasil (66%) setelah 14 penggunaan Kembali. Dalam makalah terakhir dari kelompok ini, strategi siklik diterapkan. Eversa dalam bentuk bebasnya digunakan dalam gliserolisis minyak jarak dan biopoliol yang diperoleh digunakan untuk menghasilkan matriks dimana enzim kemudian diimobilisasi.
Aplikasi Eversa
