PAPAIN ,MENURUNKAN OBESITAS
Beberapa penelitian pada hewan menunjukkan bahwa papain dapat membantu memperlambat penambahan berat badan dengan mengurangi akumulasi lemak tubuh dan lemak darah. Hasil serupa juga ditemukan pada studi jus pepaya. Namun, penelitian pada manusia masih diperlukan untuk memverifikasi hasil ini.
Obesitas adalah faktor risiko utama yang berkontribusi pada sejumlah penyakit kronis, termasuk diabetes, hipertensi, hiperlipidemia, penyakit kardiovaskular, dan kanker, dengan prevalensinya yang semakin meningkat hingga mencapai proporsi epidemi dalam beberapa dekade terakhir. Sebagian besar obat untuk pengobatan obesitas telah ditarik dari pasar karena efek sampingnya; oleh karena itu, pilihan terapi konvensional saat ini untuk pengobatan orang obesitas tidak mencukupi. Penelitian telah menunjukkan bahwa berbagai sumber alami memiliki potensi untuk dikembangkan sebagai agen anti-obesitas alami karena aksi biologisnya dan adanya senyawa fitokimia aktif.
Adipogenesis didefinisikan sebagai proses di mana preadiposit berdiferensiasi menjadi adiposit. Proses ini dapat dijelaskan dalam dua langkah: peningkatan jumlah preadiposit dan diferensiasi preadiposit menjadi adiposit matang . Diferensiasi preadiposit menjadi adiposit diatur oleh jaringan kompleks faktor transkripsi yang bertanggung jawab atas ekspresi protein kunci yang menginduksi pembentukan adiposit matang. Proses adipogenesis juga melibatkan perubahan morfologi sel, induksi sensitivitas insulin, dan perubahan kapasitas sekretori sel pada berbagai tahap diferensiasi. Pada sel mamalia, CCAAT/enhancer binding protein (C/EBP), peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR), dan sterol regulatory element-binding protein (SREBP)-1 adalah regulator utama adipogenesis. C/EBPs memainkan peran penting dalam mengaktifkan ekspresi PPAR pada tahap awal diferensiasi [6], PPAR mempromosikan ekspresi gen lipogenik, dan SREBP-1 menginduksi sintesis asam lemak, seperti acetyl-CoA carboxylase dan fatty acid synthase. Sementara itu, obesitas adalah kondisi yang mendasari penyakit inflamasi dan metabolik. Sebagai faktor risiko kuat untuk banyak penyakit, obesitas membuat tubuh terpapar pada keadaan pro-inflamasi melalui peningkatan kadar mediator inflamasi seperti tumor necrosis factor (TNF)-, interleukin (IL)-6, leptin, dan penurunan kadar adiponektin yang disekresikan oleh jaringan adiposa. Keluarga sitokin dan hormon ini secara kolektif disebut adipokin. Adipokin ini mengatur proliferasi dan apoptosis adiposit dengan mempromosikan lipolisis, menghambat sintesis lipid, dan menurunkan lipid darah melalui mekanisme autokrin dan parakrin . AMP-activated protein kinase (AMPK) adalah pengatur energi penting untuk metabolisme energi di berbagai jaringan. Telah dilaporkan bahwa AMPK menghambat sintesis asam lemak, kolesterol, isoprenoid, dan gluconeogenesis hati, sementara meningkatkan transportasi glukosa otot, oksidasi asam lemak, dan asupan kalori . Di jaringan adiposa, AMPK diaktifkan sebagai respons terhadap berbagai rangsangan ekstraseluler. Oleh karena itu, peran kunci AMPK dalam memprogram ulang metabolisme telah banyak diteliti sebagai jalur terapeutik potensial dalam pengobatan beberapa penyakit metabolik seperti diabetes, obesitas, kanker, dan inflamasi . Dengan demikian, AMPK adalah target molekuler dari obat yang digunakan dalam pengobatan penyakit metabolik, termasuk obesitas.
Carica papaya, yang termasuk dalam keluarga Caricaceae, adalah tanaman tropis yang berguna dan dimakan sebagai buah segar serta dalam bentuk minuman, selai, dan permen. Secara khusus, lateksnya mengandung enzim yang digunakan dalam industri makanan, kulit, dan farmasi. Papain adalah protease sistein yang diisolasi dan dikarakterisasi dari C. papaya dan diklasifikasikan sebagai enzim proteolitik yang memerlukan grup sulfhidril bebas untuk aktivitasnya. Enzim ini telah dipelajari secara luas untuk berbagai aplikasi di berbagai bidang seperti industri makanan, pelunakan daging, desain obat, dan persiapan farmasi. Sebagai ramuan obat tradisional, papain digunakan untuk mengurangi rasa sakit, peradangan, infeksi, pembengkakan, diare, dan alergi, selain memperbaiki pencernaan. Papain juga dikenal karena sifat penyembuhan luka, aktivitas antibakteri, serta menunjukkan efek penghambatan pada aktivasi platelet , pembentukan agregat monosit-platelet , strongyloidiasis aterosklerosis, dan adhesi peritoneal Namun, efeknya terhadap obesitas belum dipelajari. Menariknya, telah dilaporkan bahwa ekstrak buah C. papaya dalam bentuk air memiliki efek anti-obesitas pada tikus obesitas yang diberi diet tinggi lemak dan ekstrak air dari daunnya menunjukkan aktivitas anti-hiperglikemik dan hipolipidemik pada model tikus diabetes yang diinduksi alloksan
 Diperkirakan bahwa C. papaya dapat berkontribusi pada pencegahan dan pengobatan obesitas serta gangguan metabolik yang terkait.. Selain itu, C. papaya digunakan dalam pengobatan kondisi inflamasi dan menunjukkan efek anti-inflamasi. Oleh karena itu, kami berhipotesis bahwa papain dapat efektif dalam mengurangi peradangan yang terkait dengan obesitas. Penelitian juga telah menunjukkan bahwa papain terkait dengan pencegahan pembentukan adhesi peritoneal, yang disebabkan oleh respons inflamasi yang semakin mendukung hipotesis kami. Dalam penelitian ini, kami melakukan eksperimen in vivo dan in vitro untuk mengeksplorasi efek papain terhadap obesitas, dan untuk mengungkap mekanisme aksinya pada model tikus obesitas yang diinduksi diet tinggi lemak (HFD), adiposit 3T3-L1, dan adiposit primer tikus. Hasil penelitian menunjukkan bahwa papain menghambat adipogenesis dan mengurangi obesitas serta peradangan yang diinduksi obesitas melalui penghambatan faktor adipogenesis dan sitokin pro-inflamasi melalui aktivasi AMPK.
CARA MEMBUKTIKAN PAPAIN BISA MENURUNKAN OBESITASÂ
Langkah pengujian dilakukan pada mencit, sesuai prosedur yang dikembangkan oleh Kang, et al., . (2021, yakni Sebanyak 24 tikus C57BL/6J jantan berusia 4 minggu (berat 20--25 g) diperoleh dari Daehan Biolink Co. (Daejeon, Korea Selatan) dan dipelihara dalam kondisi lingkungan yang terkontrol (suhu 22 3 C, kelembapan 40%--50%, serta siklus cahaya/gelap 12 jam/12 jam). Tikus diberikan waktu adaptasi selama 1 minggu terhadap kondisi pemberian pakan, kemudian diberi akses bebas ke makanan dan air keran selama 9 minggu. Tikus dibagi secara acak ke dalam 3 kelompok, masing-masing terdiri dari 6 ekor: kelompok ND, kelompok HFD (diet 45% lemak, D12451), dan kelompok HFD yang diberikan papain (2,5 atau 5 mg/kg). Semua tikus, kecuali kelompok ND, diberi diet HFD. Papain dilarutkan dalam PBS dan diberikan secara oral setiap hari selama 4 minggu terakhir bersama dengan HFD pada kelompok yang menerima 2,5 atau 5 mg/kg papain. Berat badan tikus dicatat setiap minggu. Pada hari terakhir minggu ke-9, tikus dipuasakan semalam. Sampel darah diambil melalui tusukan jantung, dan jaringan hati serta lemak epididimis dipotong, dicuci, dan disimpan langsung pada suhu 80 C untuk analisis lebih lanjut
 PEMERIKSAAN HISTOLOGI
Jaringan hati dan lemak epididimis difiksasi menggunakan larutan formaldehida 4% (10% formalin) dan kemudian dibenamkan dalam parafin. Untuk pemeriksaan histologi, sampel dipotong dengan ketebalan 8 m dan diwarnai dengan hematoksilin dan eosin (H&E). Slide yang telah diwarnai kemudian diamati dengan mikroskop Leica DM IL LED (Leica, Wetzlar, Jerman).
