Sebuah "perpustakaan BAC" lengkap terdiri dari sekitar 20.000 bakteri yang disiapkan dengan hati-hati dengan gen hasil kloning di dalamnya.
Tetapi proses BAC itu secara inheren melewatkan beberapa bagian dari keseluruhan genom. Manusia memiliki 46 kromosom, dalam 23 pasang, yang mewakili puluhan ribu gen individu. Setiap gen terdiri dari pasangan basa yang terdiri dari Adenin (A), Timin (T), Guanin (G), dan Sitosin (C).
Ada miliaran pasangan basa ini dalam genom manusia. Pasangan basa dalam 8 persen draf genom tahun 2000 yang belum tersentuh, ternyata, terbuat dari banyak sekali pola berulang yang terlalu sulit untuk dipelajari dengan menggunakan BAC atau metode serupa.
Untuk urutan terbaru, T2T beralih ke Pacific Biosciences (PacBio) yang berbasis di Kalifornia dan Oxford Nanopore Technologies yang berbasis di Inggris. PacBio menggunakan sistem yang disebut HiFi, di mana pasangan basa disirkularisasi (dibuat menjadi lingkaran) dan dibaca berulang kali untuk memastikan akurasi.
Sistem ini baru berusia beberapa tahun dan merupakan langkah maju yang besar dalam hal panjang dan akurasi untuk urutan yang lebih panjang itu.
Sementara itu, Oxford Nanopore menekan untaian-untaian pasangan basa melalui nanopori mikroskopik, hanya satu molekul setiap kalinya, di mana untaian-untaian itu dialiri arus listrik untuk mengamati jenis molekulnya. Dengan mengalirkan arus listrik ke setiap molekul, para ilmuwan bisa mengidentifikasi untaian penuh.
Banyaknya bidang yang dicakup oleh T2T sangat mengejutkan. "Selama 20 tahun terakhir kami telah mengalami revolusi genom di mana kami mulai menempatkan fungsi, basa demi basa, di seluruh genom," kata Miga, "Sekarang kami akan mempresentasikan kepada komunitas, 200 juta basa yang belum pernah dilihat sebelumnya, untuk mulai menetapkan fungsi dan mulai memahami cara kerja genom kami."
Masih banyak pekerjaan yang harus dilakukan. Salah satu kendalanya adalah bahwa kedua proyek itu mempelajari sel yang hanya memiliki 23 kromosom, bukan 46.Â
Itu karena mereka menggunakan sel yang berasal dari sistem reproduksi, di mana telur dan sperma masing-masing membawa setengah dari muatan kromosom penuh.
Sel yang digunakan dalam penelitian terbaru berasal dari mola hidatidosa (hamil anggur), sejenis pertumbuhan reproduksi yang mewakili penyatuan yang sangat awal dan tidak bisa hidup antara sperma dan sel telur yang tidak memiliki nukleus.
Dengan memilih jenis sel ini, yang telah disimpan dan dikultur sebagai sebuah garis sel yang digunakan untuk tujuan penelitian, memotong pekerjaan pengurutan besar menjadi dua, tetapi, dalam kasus ini, hanya membawa informasi genetik dari kromosom ayah.
