Lebih dari 60 spesies mikroorganisme dapat menghasilkan lipase, seperti Aspergillus oryzae, Rhizopus oryzae, Thermomyces lanuginosus, Candida antarctica, Pseudomonas cepacia, dll. Berbagai lipase telah ditingkatkan dengan desain protein dan evolusi diarahkan dari mikroorganisme yang berbeda untuk meningkatkan thermoresistance dan toleransi terhadap metanol.
Berdasarkan model 3D struktural yang diketahui dari lipase yang berbeda, situs yang dipilih untuk mutagenesis dapat diidentifikasi.
Produksi lipase meliputi perbaikan regangan, kultur fermentasi, filtrasi, konsentrasi dan racikan, dll. Perbaikan regangan dan optimalisasi proses fermentasi meningkatkan produksi lipase dan secara langsung mengurangi biaya lipase. Dalam proses produksi biodiesel, konsentrasi lipase memegang peranan penting.
Ditemukan bahwa hasil meningkat dengan meningkatnya dosis enzim. Teknologi pemisahan membran untuk konsentrasi lipase telah dipelajari dan diterapkan di industri selama bertahun-tahun karena selektivitasnya yang tinggi, kesederhanaan, dan penghematan energi dalam proses scale-up dan operasi . Berat molekul lipase komersial sekitar 20 kDa--30 kDa, dan berat molekul CalleraTM Trans L (CalT) sekitar 30 kDa, sehingga pemisahan ultrafiltrasi dan nanofiltrasi banyak digunakan. Reinehr dkk. Â mengadopsi ultrafiltrasi dan mikrofiltrasi untuk mengkonsentrasikan lipase yang dihasilkan dari Aspergillus niger. Wijaya dkk. (2020) menggunakan membran nanofiltrasi polieter sulfon tersulfonasi, dengan berat molekul cut-off 3 kDa, untuk mengkonsentrasikan lipase yang dihasilkan dari rekombinan A. oryzae. Aktivitas enzimatik total meningkat sekitar lima kali lipat setelah dipisahkan oleh membran. Lipase pekat dari rekombinan A. oryzae mencapai hasil FAME (Fatty acid methyl ester) sebesar 96,8% dengan minyak sawit mentah sebagai bahan baku.
Proses Dimediasi Lipase yang Diimobilisasi
Lipase amobil menunjukkan banyak keuntungan selama proses produksi biodiesel, seperti pemulihan dan penggunaan kembali yang lebih mudah, toleransi yang lebih tinggi, pH dan stabilitas termal yang lebih besar, dll.
Dibandingkan dengan enzim bebas, lipase amobil dapat meningkatkan aktivitas dan stabilitas lipase dengan memodifikasi struktur protein. Â Bahan seperti silika, keramik, nanotube karbon, resin polimer, partikel magnetik, dan mikrosfer telah dieksplorasi untuk melumpuhkan lipase.
Berbagai metode untuk imobilisasi lipase telah dieksplorasi dan umumnya, tergantung pada jenis interaksi antara enzim dan pembawa, teknik ini dapat diklasifikasikan menjadi teknik imobilisasi ireversibel dan reversible.
Adsorpsi fisik dan ikatan non-kovalen adalah teknologi imobilisasi reversibel yang paling umum digunakan, termasuk ikatan afinitas dan ikatan khelasi, sedangkan ikatan silang, jebakan, dan ikatan kovalen adalah prosedur yang paling umum digunakan untuk imobilisasi lipase ireversibel.
Pembawa adalah salah satu faktor kunci yang menentukan efisiensi dan stabilitas katalitik, serta biaya, dari lipase. Berbagai jenis pembawa telah banyak dieksplorasi dalam beberapa tahun terakhir.
Bahan skala nano telah menjadi pusat penelitian dan aplikasi selama beberapa tahun. Rasio permukaan terhadap volume yang tinggi membuat bahan ini cocok untuk melumpuhkan protein. Salah satu kandidat yang paling menjanjikan adalah membran nanofibrous, yang terdiri dari banyak serat nano individu yang dibuat menggunakan pendekatan electrospinning.
