c. Masukkan sedikit (5 mL) larutan natrium bikarbonat ke dalam satu alat suntik dan sedikit air ke dalam alat suntik lainnya. Ketuk jarum suntik untuk melepaskan cakram daun dari larutan.
d. Untuk membuat ruang hampa di dalam penyedot dan memaksa udara keluar dari jaringan daun, letakkan jari Anda di atas lubang kecil di semprit sambil menarik penyedot. Pertahanka vakum ini selama sekitar 10 detik. Gerakkan jarum suntik dengan gerakan memutar sehingga cakram daun bergerak bebas di dalam larutan. Kemudian tarik kembali piston untuk melepaskan kevakuman. Solusinya menembus (membasahi) rongga di cakram daun dan cakram daun tenggelam ke dalam semprit.Â
Jika plunger tidak kembali, berarti vakum tidak berfungsi dengan baik dan harus diganti dengan spuit lain. Proses ini dapat diulang 2-3 kali untuk mengisi piringan daun. Jika mengalami kesulitan merendam cakram daun setelah sekitar tiga kali vakum, biasanya karena tidak ada cukup sabun di dalam larutan. Kemudian ditambahkan beberapa tetes sabun lagi. Namun, cakram daun Jika ditempatkan dalam vakum lebih dari 3 kali, mungkin rusak.
6. Tuang larutan dari cakram dan jarum suntik ke dalam gelas plastik bening yang sesuai. Cakram daun yang diinfiltrasi larutan bikarbonat ditempatkan dalam gelas kimia 'dengan CO2' dan cakram daun yang diinfiltrasi air ditempatkan dalam gelas kimia 'tanpa CO2'.
7. Tempatkan kedua cangkir di bawah sumber cahaya dan nyalakan pengatur waktu. Perhatikan jumlah floating disk. Jika perlu, putar larutan di dalam toples untuk menghilangkan cakram daun, terutama yang menempel di sisi toples. Lanjutkan sampai semua cakram mengapung di dalam gelas berisi larutan bikarbonat.
8. Pengujian berulang dari prosedur ini telah menunjukkan bahwa waktu rata-rata untuk 50% dari cakram daun mengapung harus digunakan sebagai titik acuan untuk pengujian ini ketika membandingkan perlakuan eksperimental yang berbeda. Poin 50% atau ET50 memberikan metode ini tingkat keandalan dan reproduktifitas yang tinggi. Ekstrapolasikan poin ini dari grafik yang dibuat dari data eksperimen.
Observasi
 1. Nyalakan lampu, nyalakan pengatur waktu dan amati pelat daun di bagian bawah cangkir. Periksa gelembung kecil di sekitar tepi dan dasar mangkuk. Setelah beberapa saat, pelat akan mulai mengapung di atas larutan.  Catat jumlah piring yang mengapung setiap menit sampai semua piring yang mengambang.
2. Berapa lama waktu yang diperlukan agar pelat pertama mengapung? Â Berapa lama waktu yang diperlukan agar setengah dari pelat tersebut mengapung?Kapan waktu semua pelat akan mengapung?
3. Setelah semua piring mengapung, letakkan cangkir di lemari atau ruangan gelap atau tutupi cangkir dengan aluminium foil. Periksa cangkir setelah sekitar 15 menit. apa yang terjadi pada piring?
Â
