1. Tentukan budaya apa yang Anda inginkan. Dimungkinkan untuk membiakkan sel tumbuhan dan hewan. Terkadang orang ingin membiakkan jaringan yang telah diperoleh langsung dari tanaman atau hewan. Di lain waktu sel dikultur dari garis sel yang sebelumnya dikultur dan disimpan.
Kultur baru dapat dibuat dari pengambilan jaringan dari suatu organisme. Sel-sel ini disebut kultur primer. Mereka hanya akan membelah begitu lama sebelum melewati masa penuaan.
Garis sel kontinu telah diubah menggunakan bahan kimia atau virus sehingga sel akan terus membelah tanpa batas.
2. Persiapkan lingkungan budaya. Kondisinya akan berbeda untuk berbagai jenis sel, tetapi secara umum, biakan akan membutuhkan:
- Temperatur terkontrol. Suhu terbaik akan bervariasi pada jenis sel yang Anda tumbuhkan, tetapi mungkin akan berkisar antara 20-45 C.
- PH terkontrol. PH terbaik mungkin berada di suatu tempat antara 6.0 dan 7.5.
- Tekanan osmotik yang terkontrol
- Pertukaran oksigen dan karbon dioksida yang memadai
- Hormon
Faktor pertumbuhan
Substrat yang akan menyediakan sel dengan nutrisi yang mereka butuhkan. Ini termasuk asam amino, karbohidrat, vitamin, dan mineral.
Cahaya. Cahaya sangat penting jika Anda menanam sel tanaman yang harus berfotosintesis. Tentukan jenis media apa yang akan Anda berikan. Banyak tipe sel tumbuh paling baik ketika mereka melekat pada substrat. Jenis media yang memungkinkan meliputi:
- Substrat padat, juga disebut patuh. Jaringan yang diperoleh dari organ seperti ginjal biasanya melekat karena mereka melekat pada jaringan ikat.
- Substrat semi-padat atau satu warna. Jenis-jenis kultur ini umumnya membentuk lapisan sel satu dalam di bagian bawah.
- Budaya suspensi. Sel jenis ini tidak perlu ditambatkan ke substrat, dan akan tumbuh saat melayang. Sel-sel dari darah sering dikultur dalam suspensi.
Cara Kedua
1. Ikuti protokol pabrikan untuk memulai kultur. Ada beberapa perusahaan yang memasok laboratorium dengan bahan dan peralatan untuk melakukan budidaya. Ketika Anda membeli materi, mereka juga akan datang dengan protokol untuk memulai budaya. Protokol-protokol ini akan menjelaskan dengan tepat bagaimana Anda harus mentransfer sampel yang ingin Anda kultur ke lingkungan kultur. Beberapa perusahaan terkenal meliputi:
- Qiagen
- Fisher Scientific
- Thermo Scientific
2. Beri makan sel-sel jika Anda bekerja dengan sel mamalia. Biasanya perlu mengisi media kultur setiap 2 - 3 hari. Ikuti protokol pabrikan untuk memberi makan sel.
Proses ini seharusnya memakan waktu 20 menit atau kurang.
