3. Teteskan 1 ml salin isotonik pada tabung sisanya (nomor 2 hingga 8) dari tiap set.
4. Tambahkan 0,1 ml serum darah pasien pada masing - masing tabung nomor 1 di tiap set dan campurkan perlahan.
5. Pindahkan 1 ml serum yang sudah diencerkan dari tabung nomor 1 ke nomor 2 lalu campurkan kembali.
6. Pindahkan 1 ml serum yang sudah terdilusi dari tabung ke nomor 3 dan campurkan lagi. Ulangi proses tersebut hingga ke tabung nomor 7 untuk tiap set.
7. Buang 1 ml serum yang telah terdilusi dari tabung nomor 7 di tiap set.
8. Tabung nomor 8 di tiap set berperan  sebagai sampel kontrol.Â
Nilai ekuivalen titer antibodi dengan dilusi serum adalah sebagai berikut  : (Tabung no. 8 = sampel kontrol)
Tabung No.Â
1 = 1 : 20
2 Â = 1 : 40
3 = 1 : 80