Mohon tunggu...
I Nyoman  Tika
I Nyoman Tika Mohon Tunggu... Dosen - Dosen
Akun Diblokir

Akun ini diblokir karena melanggar Syarat dan Ketentuan Kompasiana.
Untuk informasi lebih lanjut Anda dapat menghubungi kami melalui fitur bantuan.

menulis sebagai pelayanan. Jurusan Kimia Undiksha, www.biokimiaedu.com, email: nyomanntika@gmail.com

Selanjutnya

Tutup

Ilmu Alam & Tekno

Mengisolasi Lipase dari Bakteri yang Hidup di Laut

3 Juni 2024   21:02 Diperbarui: 3 Juni 2024   21:42 337
+
Laporkan Konten
Laporkan Akun
Kompasiana adalah platform blog. Konten ini menjadi tanggung jawab bloger dan tidak mewakili pandangan redaksi Kompas.
Lihat foto
Pantai Pulaki (Dokpri)

Dengan kemampuan untuk secara bersamaan menghasilkan protease dan lipase ekstremozim yang memiliki signifikansi ekologis dan bioteknologi. Oleh karena itu, ini sumber langka, terutama kristal garam, organisme laut, dan  produk asin bisa menjadi sumber potensial untuk mengeksplorasi hal-hal baru lipase halofilik.

Namun, sebagian besar halofil telah diisolasi dan penyaringan menggunakan metode budaya klasik. Jadi, beberapa Mikroorganisme yang tidak dapat dikultur pasti dihilangkan.

Saat ini, metode baru untuk memperoleh lipase baru dari metagenom sedang digunakan. Metode ini dapat mengatasi hambatan non-budaya, dan dengan demikian meningkatkan produktivitas peluang untuk menemukan enzim baru, padahal sebelumnya tidak tersedia dengan menggunakan metode klasik. Para peneliti telah memperoleh lipase dari metagenom berbagai sampel seperti sedimen laut dan spons laut .

Meskipun ada ruang untuk perbaikan dalam penyaringan dan ekspresi, metode ini layak untuk menemukan hal baru lipase. Terdapat banyak mikroorganisme yang tidak dapat dibudidayakan di lingkungan ekstrim; oleh karena itu, penggunaan metode metagenomik menguntungkan untuk diperoleh lipase halofilik baru.

PRODUKSI DAN PEMURNIAN

Mirip dengan produksi enzim lain, produksi lipase bergantung pada strain mikroba, substrat, dan media kultur, serta parameter fisik dan kimia proses fermentasi. Media untuk lipase produksi terutama mencakup medium basal atau medium LB mengandung ekstrak ragi dan pepton sebagai sumber karbon dan sumber nitrogen, masing-masing.  Untuk meningkatkan produksi lipase, lemak tertentu zat biasanya ditambahkan ke media. Minyak zaitun adalah aditif paling umum dengan jumlah berbeda yang digunakan: 0,5%, 1%, dan 2,5%. Aditif lainnya termasuk Tween 80 dan minyak nimba. 

Lipase halofilik dari Bacillus amyloliquefaciens diperoleh dengan menambahkan sabut kelapasebagai substrat khusus  Khususnya, harus ada  konsentrasi garam tertentu dalam media produksi lipase. Konsentrasi garam bervariasi pada strain dan strain yang berbeda berkisar antara 7% hingga 10%, 15%, 20%, dan 25%. PH media produksi lipase halofilik adalah biasanya 7.0--8.0, dan hal ini belum dilaporkan setelahnya kisaran pH ini. Suhu kultur adalah 37--40C sebagian besar bakteri. Namun, Halobacillus sp. APMSU 8 dan Bacillus atrophaeus termoalkalofilik FSHM2 dikultur pada suhu kamar dan 60C, masing-masing .

Banyak lipase halofilik yang dapat dikarakterisasi secara langsung setelah produksi, tetapi yang lain perlu dimurnikan terlebih dahulu. Meskipun ada banyak penelitian tentang produksinya lipase halofilik, hanya ada sedikit laporan tentang pemurnian.

Metode pemurnian umum untuk lipase halofilik terutama ditentukan oleh sifat-sifat lipase. Lipase halofilik adalah dimurnikan dengan prosedur tiga langkah yang melibatkan pengendapan dengan amonium sulfat dan dilanjutkan dengan kromatografi sebanyak dua kali. Pengendapan juga dilakukan dengan etanol . Kromatografi dilakukan dengan menggunakan ion- kromatografi pertukaran (pertukaran anion atau pertukaran kation) atau filtrasi gel. Bahan utama kromatografi adalah Sepharose dan Sephadex.

Lipase halofilik yang dimurnikan dideteksi dengan elektroforesis gel natrium dodesil sulfat-poliakrilamida dengan berat molekul berkisar antara 23 hingga 100 kDa.

ASPEK BIOKIMIA LIPASE

HALAMAN :
  1. 1
  2. 2
  3. 3
  4. 4
  5. 5
  6. 6
Mohon tunggu...

Lihat Konten Ilmu Alam & Tekno Selengkapnya
Lihat Ilmu Alam & Tekno Selengkapnya
Beri Komentar
Berkomentarlah secara bijaksana dan bertanggung jawab. Komentar sepenuhnya menjadi tanggung jawab komentator seperti diatur dalam UU ITE

Belum ada komentar. Jadilah yang pertama untuk memberikan komentar!
LAPORKAN KONTEN
Alasan
Laporkan Konten
Laporkan Akun