Tanaman Gandheli (Nothapodytes nimmoniana) merupakan tanaman obat yang sempat dinyatakan punah pada 1934 oleh U.N Kanjilal dalam bukunya yang berjudul “Flora of Assam”. Tanaman Gandheli memiliki kandungan Camptothecin yang bermanfaat untuk menetralisasi zat-zat penyebab kanker. Camptothecin merupakan zat kemoterapetik dengan sifat cytotoxic yang bisa merusak sel-sel kanker (Sarma, 2017).
Tanaman Gandheli hanya dapat tumbuh sampai 1-1,5 m saja sehingga tergolong dalam pohon kecil. Selain itu tanaman gandheli memiliki bunga dan buah. Bunganya berwarna kuning dengan tekstur serabut pada bagian mahkota bunga dan buah yang berwarna kuning ketika muda dan menjadi merah ketika sudah masak.
Tanaman Gandheli merupakan tanaman obat yang langka sehingga perlu dilakukan perbanyakan agar tanaman ini dapat tetap dilestarikan dan dimanfaatkan dalam bidang medis. Salah satu cara yang dapat dilakukan adalah dengan melakukan perbanyakan tanaman secara vegetatif melalui pendekatan bioteknologi yaitu teknik kultur in vitro dan teknik enkapsulasi embriosomatik yang dapat menghasilkan benih sintetik (Redenbaugh, 1992).
Teknik kultur in vitro yaitu sel-sel kalus akan berkembang menjadi embrio melalui tahapan morfologi yang khas tanpa melalui fase gamet. Perkembangan embrio somatik berkembang membentuk tumbuhan baru melalui tahap perkembangan embrio yang spesifik tanpa melalui fusi gamet disebut embriogenesis somatik. Kalus dan embriogenesis somatik yang terbentuk masih rentan terhadap kontaminasi apabila disimpan dalam waktu yang relatif lama (Toonen, 1996).
Benih sintetik merupakan salah satu teknologi penyiapan bibit hasil kultur jaringan. Benih sintetik merupakan embrio somatik yang dilapisi dengan kapsul hydrogel dengan teknik enkapsulasi, sehingga sifatnya mirip dengan benih zigotik. Kapsul berperan sebagai endosperma yang mengandung sumber karbon, nutrisi, dan zat pengatur tumbuh (ZPT). Perbanyakan tanaman secara benih sintetik bertujuan untuk perbanyakan tanaman yang bernilai ekonomi tinggi (Zulkarnain, 2009). Benih sintetik mampu disimpan dalam jangka waktu yang cukup lama tanpa kehilangan viabilitasnya, memudahkan dalam transportasi dan mudah dikemas pada saat penyimpanan (Saiprasad, 2001).
Alat dan Bahan Pembuatan Benih Sintetik
- Alat yang digunakan adalah LaminarAir Flow (LAF), autoklaf, neraca analitik, hot plate, magnetic stirrer, lemari pendingin, pH Indicator, rak kultur, cawan petri, gelas beker, botol kultur, bunsen, sprayer, pinset, scalpel, tissue steril, pipet volume, pipet tetes, lap steril, kamera digital, spidol permanent, erlenmeyer ukuran 1000 mL dan 250 mL.
- Bahan yang digunakan adalah kalus gandheli, alkohol 70%, alkohol 96%, klorox 3%, Aquades, Media MS, Agar pemadat, ZPT meliputi NAA, BAP dan GA3,Sodium aglinat 4%, HCl, NaOH, antifungal, tissue, karet, label, alumunium foil dan plastik tahan panas. Bahan benih sintetik yaitu sodium alginat dan larutan CaCl2.
Prosedur Pembuatan Benih Sintetik
1. Sterilisasi Alat dan Ruang Kerja
Sterilisasi peralatan yang akan digunakan untuk inokulasi dilakukan dengan menggunakan autoclave. Botol kultur dicuci dengan menggunkan air dan sabun. Kemudian, dibilas dengan air dan kemudian dikeringkan. Botol kultur, dimasukkan ke dalam plastik tahan panas, kemudian diikat kedua ujungnya dengan karet. Pengaduk, pinset, dan tabung Erlenmeyer dibungkus dengan menggunakan alumunium foil dan cawan petri dibungkus dengan kertas. Selanjutnya semua perlatan untuk inokulasi dan pembuatan media dimasukkan ke dalam autoclave untuk di sterilisasi pada suhu 121o C dengan tekanan 1 atm selama 30 menit.
Ruang kerja yang digunakan untuk inokulasi adalah LAF (Laminar Air Flow). Sterilisasi LAF dilakukan dengan cara menyalakan lampu UV (ultraviolet) pada LAF selama 2 jam untuk memusnahkan mikroorganisme atau kontaminan yang ada di dalam ruang kerja. Selanjutnya lampu UV dimatikan dan di nyalakan lampu neon serta blower yang ada pada LAF sehingga ruang kerja siap digunakan. Meja kerja dan peralatan inokulasi yang akan dimasukkan ke ruang kerja (LAF) disemprot alkohol terlebih dahulu beserta tangan yang akan masuk ke dalam LAF.