Tujuan
Untuk mengetahui cara menghitung bakteri secara langsung
Untuk mengetahui cara menghitung bakteri secara tidak langsung
Dapat membedakan mana kolon dan sel
Dapat melakukan enumerasi mikroba pada bahan melalui metode...dengan baik dan benar
Dasar teori
Enumerasi bakteri adalah teknik perhitungan jumlah mikroba dalam suatu media tanpa mengidentifikasi jenis mikroba (bakteri, jamur, yeast) yang bertujuan untuk menentukan jumlah sel dari suatu kultur bakteri secara kuantitatif. Penetapan jumlah bakteri dilakukan dengan menghitung jumlah sel bakteri yang mampu membentuk koloni di dalam media biakan atau membentuk suspen sedalam larutan biak. Enumerasi mikroorganisme dapat dilakukan secara langsung maupun tidak langsung. Metode yang digunakan untuk menghitung mikroba secara langsung di antaranya adalah Counting chamber, cara pengecatan dan pengamatan mikroskopik, serta filter membrane. Penghitungan secara langsung dapat dilakukan secara mikroskopis yaitu dengan menghitung jumlah bakteri dalam satuan isi yang sangat kecil. Alat yang digunakan adalah Chamber atau Haemocytometer (Brown, 2005).
Perhitungan mikroba dengan metode enumerasi dalam suatu media dilakukan tanpa identifikasi jenis mikroba. Hal ini bertujuan untuk mengestimasi jumlah sel dari suatu kultur bakteri secara kuantitatif (Garg dkk., 2010).
Pengukuran kuantitatif populasi mikroorganisme sangat diperlukan untuk berbagai macam penelaahan mikrobiologis. Terdapat berbagai macam cara untuk menghitung jumlah mikroorganisme, akan tetapi secara mendasar, ada dua cara yaitu secara langsung dan secara tidak langsung. Ada beberapa cara perhitungan secara langsung, antara lain adalah dengan membuat preparat dari suatu bahan (preparat sederhana diwarnai atau tidak diwarnai) dan penggunaan ruang hitung (counting chamber). Perhitungan secara langsung dilakukan secara mikroskopis, yaitu dengan menghitung sel di bawah mikroskop. Setiap sel dalam suspensi contoh dengan volume yang sangat sedikit dan telah diukur secara teliti, diukur dengan menggunakan slide khusus yaitu kotak penghitung (counting chamber). Volume cairan yang terdapat pada tiap kotak kecil pada kotak hitung dapat diketahui secara pasti sehingga jumlah sel dalam tiap kotak dapat terlihat dan dihitung, jadi jumlah sel/ml larutan sel dapat diketahui (Buckle dkk, 2007). Sedangkan perhitungan cara tidak langsung hanya untuk mengetahui jumlah mikroorganisme pada suatu bahan yang masih hidup saja (viable count). Dalam pelaksanaannya, ada beberapa cara yaitu: perhitungan pada cawan petri (total plate count/ TPC), perhitungan melalui pengenceran, perhitungan jumlah terkecil atau terdekat (MPN method), dan kalorimeter (cara kekeruhan atau turbidimetri) (Akhsan, 2011).
Menurut Jannasch dan Jones (1959), indeks aktivitas dan nilai biomassa mikroorganisme dapat ditunjukkan dengan mengetahui jumlah mikroorganisme dalam perairan tersebut. Untuk mengetahui jumlah mikroorganisme dalam suatu perairan ada dua cara dasar yaitu:
a. Perhitungan mikroorganisme secara langsung (direct count)